Screening for Fabry Disease in Left Ventricular Hypertrophy: Documentation of a Novel Mutation / Rastreio de Doença de Fabry na Hipertrofia Ventricular Esquerda: Documentação de uma Nova Mutação

AbstractBackground:Fabry disease is a lysosomal storage disease caused by enzyme α-galactosidase A deficiency as a result of mutations in the GLA gene. Cardiac involvement is characterized by progressive left ventricular hypertrophy.Objective:To estimate the prevalence of Fabry disease in a population with left ventricular hypertrophy.Methods:The patients were assessed for the presence of left ventricular hypertrophy defined as a left ventricular mass index ≥ 96 g/m2 for women or ≥ 116 g/m2 for men. Severe aortic stenosis and arterial hypertension with mild left ventricular hypertrophy were exclusion criteria. All patients included were assessed for enzyme α-galactosidase A activity using dry spot testing. Genetic study was performed whenever the enzyme activity was decreased.Results:A total of 47 patients with a mean left ventricular mass index of 141.1 g/m2 (± 28.5; 99.2 to 228.5 g/m2] were included. Most of the patients were females (51.1%). Nine (19.1%) showed decreased α-galactosidase A activity, but only one positive genetic test − [GLA] c.785G>T; p.W262L (exon 5), a mutation not previously described in the literature. This clinical investigation was able to establish the association between the mutation and the clinical presentation.Conclusion:In a population of patients with left ventricular hypertrophy, we documented a Fabry disease prevalence of 2.1%. This novel case was defined in the sequence of a mutation of unknown meaning in the GLA gene with further pathogenicity study. Thus, this study permitted the definition of a novel causal mutation for Fabry disease - [GLA] c.785G>T; p.W262L (exon 5).

ResumoFundamento:A doença de Fabry é uma doença lisossomal de sobrecarga provocada pela deficiência da enzima α-galactosidase A como resultado de mutações no gene GLA. O envolvimento cardíaco carateriza-se por hipertrofia ventricular esquerda progressiva.Objetivo:Estimar a prevalência da doença de Fabry numa população com hipertrofia ventricular esquerda.Métodos:Os doentes foram avaliados para a presença de hipertrofia ventricular esquerda definida por massa do ventrículo esquerdo indexada como ≥ 96 g/m2 para mulheres ou ≥ 116 g/m2 para homens. Estenose aórtica severa e hipertensão arterial, com hipertrofia ventricular esquerda discreta, foram critério de exclusão. Todos os doentes incluídos foram avaliados para a atividade da enzima α-galactosidase A com testes de gota seca. No caso de atividade enzimática diminuída, realizava-se estudo genético.Resultados:Foram incluídos 47 doentes com uma média de massa indexada de 141,1 g/m2 (± 28,5; 99,2 a 228,5 g/m2]. A maioria (51,1%) dos doentes era do sexo feminino. Nove deles (19,1%) tinham diminuição da atividade da α-galactosidase A, mas apenas um teste genético foi positivo − [GLA] c.785G>T; p.W262L (éxon 5), uma mutação não descrita na literatura. O trabalho de investigação clínica permitiu estabelecer uma associação entre a mutação e a apresentação clínica.Conclusão:Em uma população de doentes com hipertrofia ventricular esquerda, documentamos uma prevalência de doença de Fabry de 2,1%. O novo caso foi definido na sequência de uma mutação de significado indeterminado no gene GLA com posterior estudo de patogenicidade. Este estudo permitiu, assim, definir uma nova mutação causal para doença de Fabry - [GLA] c.785G>T; p.W262L (éxon 5).

La inhibición de Rho kinasa disminuye la presión arterial y activa la vía vasodilatadora del sistema renina angiotensina en la pared arterial de ratas hipertensas / Inhibition of Rho-kynase decreases systolic blood pressure and activates the vasodilating pathway

Antecedentes: La activación de Rho kinasa disminuye la formación de óxido nítrico al inhibir eNOS. Por otro lado, el rol de la vía de señalización RhoA/Rho kinasa en la actividad y expresión génica de la enzima clave en la vía vasodilatadora del sistema renina angiotensina (SRA), denominada ECA2, no es conocido. Objetivo: Determinar la participación de la vía RhoA/Rho kinasa en la actividad enzimática y en la expresión de ECA2 y de eNOS en la pared arterial en ratas hipertensas (DOCA-sal). Métodos: Se usaron ratas Sprague Dawley de 150 grs. unifrectomizadas tratadas con desoxicorticosterona (DOCA, 100 mg/Kg/sem sbc) durante 6 semanas. Como controles se usaron ratas unifrectomizadas. Un tercer grupo recibió DOCA y además el inhibidor específico de Rho, fasudil (100 mg/kg/día) por gavage durante 21 días. Al finalizar los tratamientos se determinó la presión arterial sistólica (PAS), la masa relativa del ventrículo izquierdo (MRVI mg*100/g), las actividades de ECA y ECA2 por fluorimetría y la expresión de genes de ECA, ECA2 y eNOS por RT-PCR en la aorta. Conclusión: La mayor expresión de ECA2 inducida por fasudil indujo un aumento significativo de la expresióngénica de eNOS en la pared arterial, lo que pudiera explicar el efecto de fasudil sobre ECA2. La inhibición de Rhokinasa activa la vía vasodilatadora del SRA en la pared arterial de ratas hipertensas aumentando los niveles de ECA2 y de eNOS, y disminuye los niveles de ECA.

Background: Through nitric oxide synthase (eNOS) inhibition, Rho-kynase decreases the formation of NO. The role of the RhoA/Rho kynase signaling pathway upon the activity and gene expression of the enzyme responsible for the vasodilating effects of the renin-angiotensin system (RAS), named ACE2 , is unknown. Aim: To determine the role of the RhoA/Rho kynase pathway on the activity and expression of ACE2 and eNOS in the arterial wall of rats with DOCA-salt induced hypertension. Methods: Sprague Dawley uninephrectomized DOCA hypertensive rats ( DOCA, 100mg/Kg/week sbc during 6 weeks) were used as controls. A third group received the specific Rho inhibitor fasudil (100 mg/Kg/day) in addition to DOCA for 21 days. At the end of the treatment period, blood pressure, relative left ventricular mass (RLVIM,mg*100/g), ACE and ACE2 activities (fluorometry) were determined. The expression of ACE and ACE2 genes, along with eNOS in the aortic wall were determined by RT-PCR. Results: Are expressed as mean +/- SEM.

El aumento de la actividad y expresión de la enzima convertidora de angiotensina I homóloga (ECA2) inducido por enalapril se asocia a menor fibrosis e hipertrofia ventricular izquierda post infarto al miocardio en la rata / Enalapril induced increase in Homologous Angiotensin I converting enzyme (ECA2) is associated to decreased fibrosis and decreased left ventricular hypertrophy post myocardial infarction in rats

Recientemente se ha descubierto el gen de una nueva enzima convertidora de angiotensina I- homóloga a ECA y denominada ECA-2 que finalmente lleva a producir angiotensina 1-7. Esta segunda vía del sistema reninaangiotensina (SRA), con la ECA-2 tendría acciones opuestas a la ECA. Objetivo y Métodos: Determinar la actividad y expresión de la ECA2 en el tratamiento de la hipertrofia y fibrosis ventricular izquierda tardía post IAM en la rata. Se usaron ratas Sprague Dawley 200 +/- 10 g sometidas a ligadura de la coronaria izquierda. Como controles se usaron ratas sham (S). 48 hrs. post cirugía, un grupo de ratas IAM recibió enalapril (IAM-ENA; 10 mg/kg, gavage). A las 8 semanas post-operatorias se determinó la presión arterial sistólica (PAS), masa corporal(MC), masa cardíaca relativa (MCR, mg VI/100 g MC, expresión proteica de la cadena pesada de la miosina beta(betaMHC) por Western blot, mRNA por RT-PCR, las actividades enzimáticas de ECA y de ECA-2 por fluorimetría tanto circulante como en ventrículo izquierdo (VI), el contenido de colágeno total por rojo picrosirio y la actividad de metaloproteasa 2 (MMP-2) por zimografía. Conclusión: El aumento de la actividad y expresión de la ECA2 (a nivel circulante y tisular cardíaco) se asocia a menor fibrosis e hipertrofia ventricular izquierda, lo que podría aumentar – en ese periodo - el efecto cardioprotector de Ang-(1-7).

Background. Recently the gene of a new angiotensin-1 converting homologous enzyme (ACE-2) which leads to the production of angiotensin 1-7 (Ang (1-7) has been reported. This new pathway of the renin-angiotensin system(RAS) is supposed to have opposite effects to those of ACE. Aim: To determine the activity and expression of ACE-2 in the development of left ventricular hypertrophy and fibrosis late after induced myocardial infarction (AMI) in rats. Methods: 200 +/- 10g Sprague-Dawley rats were submitted to left coronary artery ligation. Sham operated rats were used as controls. 48 hr after surgery, one group of AMI rats received enalapril (AMI-En), 10mg/Kg. 8 weeks after surgery the systolic blood pressure (SBP), body mass (BM) and relative cardiac mass (RCM, mg/100g BM) were measured. The protein expression of heavy weight chain beta myosin (beta HCM) was determined by Western Blot, mRNA through RT-PCR, circulating and left ventricular ACE and ACE-2 activities through fluorometry, total collagen content by the pycrosirius red method and metaloproteinase-2 (MMP-2) through zymography were determined. Conclusion: The increased activity and expression of ACE-2 both in plasma and the LV is associated to less fibrosis and left ventricular hypertrophy after AMI. This could temporarily boost the cardioproctive effect of Ang (1-7).

Correlación del polimorfismo (I/D) del gen de la ECA y la función ventricular en pacientes con miocardiopatía dilatada de origen isquémico e idiopático / ACE gene polymorphysm correlation (I/D) with the ventricular function in patients with ischemic and dilate idiopathic cardiomyopathy

Dilated cardiomyopathy is a myocardial disease, characterized by biventricular expansion. Renin-angiotensin-aldosterone system (RAAS) is closely related with the progress of this pathology. Has been shown that angiotensin converting enzyme (ACE) gene insertion/deletion (I/D) polymorphism influences as much in the plasmatic concentration as in activity of ACE. In addition, ACE I/D polymorphism has been associated with remodeling phenomena and an increased risk to develop several cardiovascular diseases. On virtue of the influence of ACE gene polymorphism on RAAS, we studied the correlation between ACE I/D polymorphism with morphologic and functional clinical alterations in ischemic or idiopathic dilated cardiomyopathy in one attempt to establish its utility as prognosis factor. Methods and results. We studied 30 patients of The National Institute of Cardiology. Ventricular function was evaluated by transthoracic echocardiography. ACE genotype was determined by polymerase chain reaction (PCR). Results for left ventricle shown: Tei Index was increased in patients with II genotype (0.84 vs. 0.48) when were compared to patients with DD genotype p < 0.01. Eccentricity Index was lesser in the group with II genotype (0.64), than in the group DD (0.86) p < 0.01. Ventricular mass was increased in DD patients when was compared with II group (174 g vs. 133 g) Isovolumetric contraction time was shorter in group DD than in II (45 mseg vs. 139 mseg) p < O.OB. These findings denote better preservation of left ventricular function in patients with DD genotype. In opposition, right ventricle shown an increased Tei Index in the group with DD genotype (1.01) when was compared with II genotype (0.55), p < 0.05. Pulmonary artery systolic pressure tended to be higher in DD genotype group without reach statistic significance. Conclusions. In our group of study, patients with DD genotype shown better left ventricular function in ischemia or idiopathic dilated cardiomyopathy. On the opposite right ventricular function were more deteriorated in patients with ACE DD genotype.

La miocardiopatía dilatada es una enfermedad primaria del miocardio, caracterizada por dilatación biventricular. El sistema renina-angiotensina-aldosterona (SRAA) está estrechamente relacionado con el progreso de esta patología. Se ha demostrado que el polimorfismo inserción/deleción (I/D) del gen de la enzima convertidora de angiotensina (ECA) influye en la concentración plasmática y la actividad de esta enzima, además este polimorfismo se ha asociado con fenómenos de remodelación e incremento en el riesgo de padecer diferentes enfermedades cardiovasculares. En virtud de la influencia de las variantes polimórficas del gen de la ECA sobre la respuesta del SRAA, en el presente trabajo se estudió la posible correlación del polimorfismo I/D del gen de la ECA con las alteraciones clínicas morfológicas y funcionales de la cardiomiopatía dilatada tanto de origen isquémico como de origen idiopático con el fin de establecer su posible utilidad como factor pronóstico. Métodos y resultados. El estudio incluyó a 30 pacientes seleccionados de la consulta externa del Instituto Nacional de Cardiología <>, la función ventricular se valoró mediante ecocardiografía transtorácica. El genotipo de la ECA se determinó por reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Resultados para el ventrículo izquierdo: El índice de Tei se observó visiblemente incrementado en los pacientes con genotipo II 0.84 vs. 0.48 de los pacientes con genotipo DD p < 0.01. El índice de excentricidad fue menor en los casos con genotipo II: 0.64, comparado con aquellos con genotipo DD: 0.86 p < 0.01. La masa ventricular tendió a ser mayor en el grupo DD en relación con el II (174 g vs. 133 g). El tiempo de contracción isovolumétrica fue menor en el grupo DD en comparación al II (45 mseg vs. 139 mseg) p < 0.05, estos hallazgos denotan una mejor preservación de la función ventricular izquierda en los pacientes con genotipo DD. Por otra parte, el ventrículo derecho mostró un comportamiento distinto al observado para el ventrículo izquierdo, pues el índice de Tei fue mayor para los pacientes con el genotipo DD (1.01) comparado con el grupo del genotipo II (0.55), p < 0.05. La presión sistólica de la arteria pulmonar tendió a ser mayor en los pacientes con genotipo DD sin alcanzar una significancia estadística. Conclusión. El genotipo DD se asocia con una mejor función ventricular izquierda en los pacientes con miocardiopatía dilatada de origen tanto isquémico como idiopático; por el contrario, la función ventricular derecha de los pacientes con genotipo DD muestra una mayor alteración en el índice de Tei en esta patología.